尾靜脈注射是動物實驗中的一項關(guān)鍵技術(shù)，因其給藥精準(zhǔn)可靠，被廣泛應(yīng)用于藥代動力學(xué)和全身性疾病模型（如腫瘤轉(zhuǎn)移、感染）研究。然而，較高的操作門檻常讓科研新手感到難以掌握。本文將系統(tǒng)拆解尾靜脈注射的核心流程與實用技巧，涵蓋從準(zhǔn)備、固定、血管定位到注射及特殊情況的處理，助您掌握這項不可或缺的實驗技能。

核心流程詳解

1. 周密準(zhǔn)備：成功的起點

? 基礎(chǔ)器材：確保備齊1ml注射器（推薦使用4.5號針頭）、75%酒精棉球和小鼠專用固定器（圖1）。注射器吸入藥液后，必須徹底排盡內(nèi)部空氣，這是防止空氣栓塞導(dǎo)致小鼠急性死亡的關(guān)鍵步驟。

? 穩(wěn)固固定（核心環(huán)節(jié)）：限制小鼠活動是操作成功的基石。強(qiáng)烈推薦使用小鼠固定器（圖2）。其前端設(shè)計有氣孔保證呼吸通暢，后端可拉出鼠尾進(jìn)行注射。使用時需確保小鼠在固定器內(nèi)活動空間極小，有效防止注射過程中的掙扎。

圖1

圖2

2. 精準(zhǔn)定位與血管擴(kuò)張：看清目標(biāo)

? 認(rèn)識目標(biāo)血管：小鼠尾部靜脈系統(tǒng)由三條主要靜脈組成：一條位于背側(cè)（較深且細(xì)），兩條位于左右兩側(cè)（較淺表）。此外，腹側(cè)有一條動脈（圖3）。通常優(yōu)先選擇左右兩側(cè)的尾靜脈進(jìn)行注射，因其位置更淺、更易操作。

圖3

讓血管清晰可見： 小鼠尾靜脈非常纖細(xì)，直接注射難度大。操作前可以采取以下方法擴(kuò)張血管：

? 溫水浸泡法：將鼠尾末端浸入45-50℃的溫水中約2分鐘，有效促進(jìn)血管擴(kuò)張。

? 酒精擦拭法：用酒精棉球反復(fù)、適當(dāng)?shù)赜昧Σ潦媚繕?biāo)血管區(qū)域（圖4）。酒精既能擴(kuò)張血管，又能軟化尾部的表皮角質(zhì)層，顯著降低進(jìn)針阻力。

圖4

? 紅外燈照射法： 使用紅外線烤燈照射鼠尾3-5分鐘，利用熱能刺激使靜脈充分充盈，尤其適用于血管不易觀察的品系。

3. 注射操作：核心技巧與手感判斷

? 起始進(jìn)針點：左手拇指在上，食指在下，捏住小鼠尾巴末端1/3處，轉(zhuǎn)動尾巴使一側(cè)靜脈血管顯現(xiàn)，食指上提，拇指下壓使尾巴彎曲，尾巴轉(zhuǎn)折點在拇指上方，下針位置即在尾巴的轉(zhuǎn)折點處（圖5）。此處皮膚相對較薄，血管在擴(kuò)張后相對清晰，且為后續(xù)可能的失敗嘗試留出了向近心端移動的空間。

圖5

? 進(jìn)針角度與手法： 針頭與靜脈盡量平行(10至15度)（圖6），注射器針頭斜口朝上慢慢扎入血管，一旦感覺針尖有輕微的“刺空感”(針頭斜口約2/3 插入血管)后，針頭略微往上挑將整個針頭斜口全部進(jìn)入血管，然后保持平行于血管走向再稍微推進(jìn)少許，確保針尖完全進(jìn)入血管腔。

圖6

? 成功注射的關(guān)鍵標(biāo)志：

? 回血現(xiàn)象：針頭刺入靜脈后，通常可在針管透明接口處觀察到少量血液自然回流，這是判斷針尖位于血管內(nèi)的直接證據(jù)（需清晰觀察）。

? 無阻力推注：推注藥液時手感必須極其順暢，幾乎感覺不到阻力。這是判斷針尖是否在血管內(nèi)的核心手感。

? 血管內(nèi)流動顯影：在藥液推入過程中，可清晰觀察到血管由淡紫色轉(zhuǎn)為不可見（圖7）。

圖7

? 拔針與有效止血：注射完成后，緩慢旋轉(zhuǎn)針頭將其退出血管。迅速用干燥棉球或紗布適度用力、持續(xù)按壓注射點，直至確認(rèn)完全止血（圖8）。此步驟對保護(hù)血管完整性、減少淤血、為后續(xù)可能的注射創(chuàng)造條件至關(guān)重要。

圖8

? 失敗征兆與應(yīng)對：

? 推注阻力巨大：手感明顯阻塞，難以推動藥液?！橆^未進(jìn)入血管

? 組織腫脹變白：藥液未能進(jìn)入血管而滲入皮下組織，導(dǎo)致局部皮膚變白、鼓起或形成皮丘。——針頭未進(jìn)入血管

? 拔針后大量滲出：針孔處有血液和/或藥液持續(xù)滲出。——針頭未進(jìn)入血管或進(jìn)入血管較淺

? 尾部淤血腫脹：操作失敗后，尾部可能出現(xiàn)明顯的暗紫色淤血區(qū)域及整體腫脹?！橆^未進(jìn)入血管/注射時可能由于多次操作損傷周圍組織/藥液刺激性過大

? 應(yīng)對策略：一旦感知阻力或出現(xiàn)上述現(xiàn)象，立即停止推注，退針后，充分按壓止血。隨后選擇更靠近尾根（近心端）的新位置重新嘗試注射。

4. 不同品系小鼠的操作差異

? 裸鼠：裸鼠的靜脈血管雖然呈扁平狀且相對細(xì)小，但由于其無毛且皮膚近乎透明，血管的可見度是最高的，操作相對最為容易。按照前述標(biāo)準(zhǔn)流程操作即可。

? 白化小鼠（如ICR, BALB/c）：白鼠的血管在酒精充分擦拭后通常比較清晰可見，操作難度中等。注意擴(kuò)張血管和進(jìn)針技巧。

? 黑色/深色皮毛小鼠（如C57BL/6）：黑鼠的血管最難辨別，是操作的主要難點。必須更加依賴血管擴(kuò)張技巧（強(qiáng)烈推薦紅外燈照射與酒精擦拭結(jié)合使用），并需要更仔細(xì)地觀察。此外，深色品系鼠尾皮膚有時更堅韌，進(jìn)針需施加稍大力氣，但務(wù)必避免刺入過深。

5. 特殊注射物的注意事項（細(xì)胞、病毒、細(xì)菌懸液）

尾靜脈注射不僅用于給藥，也廣泛用于建立疾病模型，如通過注射腫瘤細(xì)胞建立轉(zhuǎn)移模型、注射病毒載體進(jìn)行基因操作或感染研究、注射細(xì)菌建立菌血癥模型等。處理這類懸液時，除遵循前述通用技巧外，需特別注意以下關(guān)鍵點：

? 懸液均勻性與濃度：細(xì)胞、病毒或細(xì)菌懸液在吸入注射器前，必須充分混勻、確保懸液顏色均勻、無肉眼可見的團(tuán)塊或沉淀。這類懸液通常比普通藥液更粘稠。

? 嚴(yán)格控制注射速度：推注速度不能過快，且需要勻速平穩(wěn)推注！ 過快的注射速度（尤其是細(xì)胞懸液）極易導(dǎo)致急性肺栓塞、心血管休克甚至小鼠急性死亡。注射過程中需密切觀察小鼠的呼吸、活動狀態(tài)等生命體征。

? 術(shù)后保溫與監(jiān)護(hù)：注射大量細(xì)胞或病原體后，小鼠常出現(xiàn)體溫下降、虛弱甚至休克。若出現(xiàn)此類情況時，注射后應(yīng)立即將小鼠轉(zhuǎn)移到恒溫墊或暖臺上，持續(xù)監(jiān)護(hù)直至其完全恢復(fù)活動能力和正常體溫。

? 嚴(yán)格的生物安全防護(hù)：操作此類物質(zhì)時，務(wù)必全程佩戴手套、口罩及護(hù)目鏡。強(qiáng)烈建議在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行注射操作，最大程度防止懸液濺灑造成實驗人員感染或環(huán)境污染。使用過的注射器、接觸物及動物廢棄物必須嚴(yán)格按照生物危害物處理規(guī)范進(jìn)行處置。

6. SD大鼠的尾靜脈注射要點

大鼠尾靜脈注射的基本原理和操作步驟與小鼠類似，但需額外注意兩點：

? 更強(qiáng)的固定需求：大鼠力量更大，掙扎更劇烈。必須使用專用大鼠固定器或采取非常穩(wěn)固的徒手/輔助固定方式，確保其身體和尾部在注射過程中幾乎無法移動。

? 更充分的血管暴露：大鼠尾部角質(zhì)層通常更厚。需要更長時間（或更高溫度）的溫水浸泡或酒精更大力度地反復(fù)擦拭，以充分?jǐn)U張和清晰顯現(xiàn)尾靜脈。

精進(jìn)之道：理解、細(xì)節(jié)與練習(xí)

掌握尾靜脈注射的精髓在于透徹理解尾靜脈的解剖位置與特點，精準(zhǔn)把握操作的核心細(xì)節(jié)（如進(jìn)針點選擇、平行進(jìn)針、上挑角度、無阻力手感），并通過反復(fù)、規(guī)范的練習(xí)來培養(yǎng)穩(wěn)定的操作手感和遇到問題時的判斷力。

尾靜脈注射雖具挑戰(zhàn)性，但它是連接實驗設(shè)計與科學(xué)發(fā)現(xiàn)的重要橋梁。熟練掌握此項技術(shù)，能極大提升實驗效率和模型成功率。通過理解原理、關(guān)注細(xì)節(jié)、勤加練習(xí)并參考本文提供的圖解指南，每一位科研工作者都能攻克這一技術(shù)難關(guān)。請務(wù)必保持耐心細(xì)致，科學(xué)探索之路亦在于此~