基因編輯小鼠制作過程

全身性基因敲除（KO小鼠）

全身性基因敲除小鼠，能夠?qū)崿F(xiàn)靶基因在小鼠全生命過程、全組織器官中的功能永久缺失，是在小鼠體內(nèi)研究基因功能的最常用、最簡單的手段之一。

基因敲除小鼠可以通過人工核酸酶打靶或ES細(xì)胞打靶技術(shù)完成制備。在使用人工核酸內(nèi)切酶制備基因敲除小鼠的過程中，需要將特異性靶向目的基因的核酸酶系統(tǒng)，通過顯微注射技術(shù)導(dǎo)入小鼠受精卵，造成靶基因區(qū)域雙鏈DNA斷裂，而后通過非同源性末端接合（NHEJ）等損傷修復(fù)途徑修復(fù)斷裂，造成靶基因移碼突變或長片段編碼序列缺失，實(shí)現(xiàn)基因敲除。由于基因編輯的隨機(jī)性和嵌合型，受精卵發(fā)育而來的小鼠仍需與野生型小鼠繁育后，獲得均一的、能夠穩(wěn)定遺傳的雜合子KO小鼠，內(nèi)交后即可得到純合子全身性基因敲除小鼠。

使用ES細(xì)胞打靶時(shí)，通常需構(gòu)建以新霉素（neo）篩選子取代一個(gè)到多個(gè)編碼外顯子的供體質(zhì)粒，轉(zhuǎn)入ES細(xì)胞。篩選重組后的ES細(xì)胞，通過囊胚注射導(dǎo)入受體胚胎，獲得部分細(xì)胞來源于ES的嵌合鼠。通過將嵌合小鼠與野生型小鼠配繁，最終獲得攜帶全身性敲除基因的雜合子小鼠，雜合子內(nèi)交后即可獲得純合子KO小鼠，用于表型分析和后續(xù)相關(guān)研究。

資源優(yōu)勢

• 品系資源庫大：12000+KO小鼠品系，10000+cKO小鼠品系已完成制作

• 供貨速度快：最快1周可交付，覆蓋數(shù)百種KO/CKO/Cre工具鼠品系

• 使用更友好：自主產(chǎn)權(quán)品系，使用無憂

• 發(fā)表文獻(xiàn)多：600+的文獻(xiàn)發(fā)表量，影響因子超7800分

應(yīng)用場景

涵蓋腫瘤、免疫、代謝、內(nèi)分泌、心血管、神經(jīng)及傳染病等生命科學(xué)和醫(yī)學(xué)研究全領(lǐng)域的：

• 基因功能研究

• 疾病機(jī)理解析

• 疾病動(dòng)物模型構(gòu)建

案例展示

1. B6-Alms1-del(c.3802-3812)（T017633 MASH模型）

圖1 B6-Alms1-del雄鼠自發(fā)肥胖表型

圖2 B6-Alms1-del雄鼠自發(fā)出現(xiàn)2型糖尿病表型

2. B6-Trex1-KO（T013987 系統(tǒng)性紅斑狼瘡）

圖1  B6和 B6-Trex1-KO 小鼠血清中的Anti-dsDNA水平

圖2 8周齡小鼠 HE 染色病理切片