2021年3月25日，百時(shí)美施貴寶（BMS）公布LAG-3單抗藥物RELATIVITY-047 III期臨床研究初步結(jié)果，相比于單獨(dú)使用PD-1抗體治療轉(zhuǎn)移性或不可手術(shù)切除的黑色素瘤，PD-1抗體Opdivo聯(lián)合LAG-3抗體Relatlimab可顯著改善患者無(wú)進(jìn)展生存期（PFS）。臨床研究隨訪仍在進(jìn)行中，目前聯(lián)合療法耐受性良好，未出現(xiàn)任何預(yù)期外的安全性事件。

LAG-3（Lymphocyte-activationgene 3），又名CD223，由Frédéric Triebel及其團(tuán)隊(duì)于1990年首先發(fā)現(xiàn)。LAG-3也是一類免疫檢查點(diǎn)受體蛋白，主要表達(dá)于活化的CD4+T、CD8+T、B細(xì)胞、NK細(xì)胞以及樹(shù)突狀細(xì)胞等免疫細(xì)胞表面。LAG-3與CD4受體的蛋白序列相似，但親和力強(qiáng)于CD4。LAG-3其配體之一是主要組織相容性復(fù)合體MHCII類分子，主要位于APC類細(xì)胞，其另一配體為DC-SIGN族成員之一LSECtin，主要表達(dá)在肝細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞表面（如圖1所示）^[1]。

圖1. LAG-3及其配體分布示意圖^[1]

LAG-3對(duì)各種類型的淋巴細(xì)胞產(chǎn)生不同的抑制作用（如圖2所示）^[2]。其中LAG-3主要抑制T細(xì)胞的活化和細(xì)胞因子分泌，從而保持機(jī)體免疫穩(wěn)態(tài)。敲除LAG-3基因或體內(nèi)抗體阻斷LAG-3功能，可提升IL2、IL-4、IFN-γ和TNFα等細(xì)胞因子的分泌，使器官或腫瘤中的抗原特異的CD8+T細(xì)胞的聚集和效應(yīng)功能增加^[3]。因此，阻斷LAG-3是一種潛在的腫瘤治療方法。

圖2. LAG-3與TILs細(xì)胞的關(guān)聯(lián)性^[2]

在癌癥疾病中，LAG-3與PD-1、CTLA-4等免疫檢查點(diǎn)具有顯著的協(xié)同抑制免疫作用（如圖3所示）^[4,5]，如，PD-1和LAG-3協(xié)同會(huì)加速T細(xì)胞耗竭。聯(lián)合使用PD-1抗體和LAG-3抗體有望進(jìn)一步解除機(jī)體免疫抑制，實(shí)現(xiàn)良好的抗腫瘤效果。

圖3. LAG-3信號(hào)傳導(dǎo)以及與其他免疫檢查點(diǎn)相互作用示意圖^[2]

^{目前全球范圍內(nèi)，多家藥企布局了LAG-3靶點(diǎn)融合蛋白或抗體，國(guó)內(nèi)再鼎醫(yī)藥、藥明康德、岸邁生物、時(shí)邁藥業(yè)、恒瑞醫(yī)藥，維立志博、信達(dá)生物、復(fù)宏漢霖、科倫博泰等生物醫(yī)藥公司的LAG-3抗體已經(jīng)申報(bào)臨床（如圖4所示）。}

圖4. 國(guó)內(nèi)LAG-3靶點(diǎn)藥物研發(fā)狀態(tài)（數(shù)據(jù)來(lái)源于醫(yī)藥魔方數(shù)據(jù)庫(kù)）

LAG-3腫瘤免疫抗體藥物是國(guó)內(nèi)外醫(yī)藥企業(yè)藥物研發(fā)投入的重點(diǎn)領(lǐng)域?？煽康膭?dòng)物模型,尤其是人源化小鼠模型,可以加快腫瘤免疫抗體藥物的研發(fā)進(jìn)程。

集萃藥康利用基因編輯技術(shù)將小鼠的Pdcd1、Pdl1和Lag3基因編碼胞外區(qū)的部分替換為相應(yīng)的人源PD1、PDL1和LAG3基因片段，同時(shí)保留了鼠源相應(yīng)基因的胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)區(qū)，保證了細(xì)胞信號(hào)的正確傳導(dǎo)不受影響。B6小鼠和BALB/c小鼠背景的Pdcd1、Pdl1和Lag3單靶點(diǎn)、雙靶點(diǎn)以及三靶點(diǎn)的人源化小鼠模型，該類模型是篩選和評(píng)價(jià)人PD1、PDL1與LAG3抑制劑藥物以及聯(lián)合用藥的理想動(dòng)物模型。

基于BALB/c-hPD1/hLAG3的體內(nèi)藥效試驗(yàn)。利用BALB/c-hPD1/hLAG3小鼠皮下接種CT26.WT模型評(píng)價(jià)Anti-LAG3與Keytruda的體內(nèi)藥效實(shí)驗(yàn)。

結(jié)果顯示：?jiǎn)嗡幗MAnti-LAG3(5mpk)，Anti-LAG3(10 mpk)對(duì)腫瘤生長(zhǎng)具有抑制作用，且高劑量的Anti-LAG3腫瘤抑制效果更為顯著；單藥組Keytruda(1mpk)，Keytruda(3mpk)對(duì)腫瘤的生長(zhǎng)有明顯抑制作用，抑制效果相近。

結(jié)果表明：PD1、LAG3雙人源化小鼠是評(píng)估anti-hPD1和anti-hLAG3抗體體內(nèi)聯(lián)合藥效的理想動(dòng)物模型。

除了LAG-3靶點(diǎn)的人源化模型，集萃藥康還有眾多免疫檢查點(diǎn)歡迎垂詢。

參考文獻(xiàn)

[1] Ana Cet al. Kuchroo, Lag-3, Tim-3, and TIGIT: Co-inhibitory Receptors withSpecialized Functions in Immune Regulation. Immunity; 44, 5, 2016, 989-1004.DOI:10.1016/j.immuni.2016.05.001.

[2] Long L, et al. The promising immune checkpoint LAG-3: from tumor microenvironment to cancer immunotherapy. Genes Cancer. 2018; 9(5-6): 176-189. DOI: 10.18632/genesandcancer.180.

[3] Grosso, et al. LAG-3 regulates CD8+ T cell accumulation and effector function in murine self-and tumor-tolerance systems." The Journal of clinical investigation; 2007, 117, 11, 3383-3392.

[4] Burugu S et al. Nielsen, LAG-3+ tumor infiltrating lymphocytes in breast cancer: clinical correlates and association with PD-1/PD-L1+ tumors. Annals of oncology, 2017, 28,12；2977-2984. DOI:0.1093/annonc/mdx557

[5] Huang UY, et al. Compensatory upregulation of PD-1, LAG-3, and CTLA-4 limits the efficacy of single-agent checkpoint blockade in metastatic ovarian cancer. OncoImmunology, 2017, 6, 1. DOI:10.1080/2162402X.2016.1249561