huPBMC-NCG
huPBMC-NCG小鼠是將人外周血單個核細(xì)胞（Peripheral Blood Mononuclear Cell, PBMC）移植到重度免疫缺陷小鼠NCG體內(nèi)，從而獲得的重建人免疫系統(tǒng)的NCG小鼠模型。在NCG小鼠上進(jìn)行的huPBMC免疫重建效率高，速度快，重建后以淋巴T細(xì)胞為主，可用于多種腫瘤免疫藥物的評價。huPBMC-NCG小鼠免疫重建后生存周期為5-7周，給藥周期相對較短。由于T細(xì)胞重建速度非常快，人源T細(xì)胞會識別并攻擊小鼠組織從而發(fā)生移植物抗宿主?。℅vHD），因此該模型可以用來評價GvHD藥物。
由于huPBMC供體之間的差異性明顯，為排除不同供體來源的PBMC對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，集萃藥康通過篩選建立了huPBMC供體庫，用于保證huPBMC-NCG免疫重建的穩(wěn)定性。
應(yīng)用領(lǐng)域
1. 人源腫瘤細(xì)胞、腫瘤組織移植（CDX，PDX）
2. 藥效評價（小分子、大分子、聯(lián)合用藥）
3. 人類癌癥模型
4. 干細(xì)胞研究
免疫系統(tǒng)人源化小鼠是指在重度免疫缺陷小鼠（如NCG）體內(nèi)移植人的造血細(xì)胞、淋巴細(xì)胞或組織，獲得具有人源免疫系統(tǒng)的小鼠模型，包括huPBMC-NCG和huHSC-NCG小鼠。免疫系統(tǒng)人源化小鼠結(jié)合CDX或PDX造模，可用于研究人類免疫系統(tǒng)環(huán)境下腫瘤的生長，評價抗腫瘤治療方案，尤其是助力基于免疫治療的新藥開發(fā)。
模型數(shù)據(jù)
huPBMC-NCG
圖1. huPBMC-NCG小鼠人源化模型實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)流程圖
huPBMC-NCG小鼠是將人外周血單個核細(xì)胞（Peripheral Blood Mononuclear Cell, PBMC）移植到重度免疫缺陷小鼠NCG體內(nèi)，從而獲得的重建人免疫系統(tǒng)的NCG小鼠模型。在NCG小鼠上進(jìn)行的huPBMC免疫重建效率高，速度快，重建后以淋巴T細(xì)胞為主，可用于多種腫瘤免疫藥物的評價。huPBMC-NCG小鼠免疫重建后生存周期為5-7周，給藥周期相對較短。由于T細(xì)胞重建速度非?？?，人源T細(xì)胞會識別并攻擊小鼠組織從而發(fā)生移植物抗宿主病（GvHD），因此該模型可以用來評價GvHD藥物。由于huPBMC供體之間的差異性明顯，為排除不同供體來源的PBMC對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，需要通過篩選Donor，保證huPBMC-NCG免疫重建的穩(wěn)定性。
圖2. huPBMC-NCG小鼠的生存曲線
分別將來源于供體F和供體G的huPBMC注射到NCG小鼠中，分析huPBMC-NCG免疫重建小鼠的存活時間。由于植入的PBMC為異源免疫細(xì)胞，huPBMC-NCG小鼠會隨著時間推移產(chǎn)生GvHD，縮短了huPBMC-NCG小鼠的使用窗口期。本研究發(fā)現(xiàn)NCG小鼠移植huPBMC一個月左右陸續(xù)出現(xiàn)死亡。
圖3. huPBMC-NCG免疫重建水平
利用流式細(xì)胞技術(shù)檢測huPBMC-NCG小鼠人源化進(jìn)程中外周血中人白細(xì)胞比例。隨著時間推移，huPBMC-NCG小鼠外周血中人白細(xì)胞的比例逐漸增加，第三周時平均人白細(xì)胞比例超過50%。huPBMC-NCG免疫重建速度快，重建細(xì)胞以CD3+T細(xì)胞為主。數(shù)據(jù)以Mean ±SEM形式呈現(xiàn)。
圖4. 基于huPBMC-NCG小鼠體內(nèi)藥效試驗(yàn)
分別使用兩種不同Donor來源的huPBMC細(xì)胞構(gòu)建huPBMC-NCG，并接種PDL1高表達(dá)細(xì)胞系MDA-MB-231構(gòu)建皮下荷瘤模型。huPBMC接種后會影響MDA-MB-231在NCG體內(nèi)的成瘤速度。待腫瘤生長至平均體積約100 mm3時隨機(jī)分為Vehicle（對照）組及Tecentriq給藥組，使用相應(yīng)藥物進(jìn)行治療。每周給藥2次，連續(xù)給藥三周。結(jié)果顯示Tecentriq對腫瘤生長有明顯抑制作用（PBMC-01，TGI=45.41%；PBMC-02，TGI= 56.96%）。數(shù)據(jù)以Mean ± SEM形式呈現(xiàn)。
基于huPBMC-NCG小鼠體內(nèi)GvHD藥效研究
圖5. 小鼠在PBMC重建后會出現(xiàn)GvHD表型，弓背，炸毛現(xiàn)象
圖6. 基于huPBMC-NCG小鼠評價GvHD藥物
將huPBMC尾靜脈移植至NCG小鼠體內(nèi)會產(chǎn)生GvHD的癥狀，通過給予Abatacept（CTLA4融合蛋白）能夠顯著緩解GvHD癥狀。結(jié)果顯示Abatacept延長了huPBMC-NCG小鼠的生存周期，且隨著給藥劑量的增加，生存周期明顯延長，體重增加。