B6-hPCSK9人源化模型及其藥效評價
隨著生活水平的提高，人們飲食結(jié)構(gòu)的改變，高脂血癥( hyperlipidemia，HLP)?發(fā)病率越來越高，HLP?嚴(yán)重危害著人類的身體健康，因為長期血脂過高會引發(fā)機(jī)體代謝紊亂，進(jìn)而產(chǎn)生動脈粥樣硬化、冠心病、心肌梗死等心腦血管疾病。因此，對高脂血癥的預(yù)防和相關(guān)治療藥物開發(fā)尤為重要。
PCSK9是一種已知的分泌因子，可負(fù)向調(diào)節(jié)細(xì)胞膜上LDLR的表達(dá)水平。PCSK9主要在肝組織中表達(dá)。分泌的PCSK9與LDLR結(jié)合，在溶酶體的作用下降解。對人類PCSK9基因的研究表明，PCSK9功能獲得性突變與家族性高脂血癥有關(guān)，PCSK9功能喪失性突變的LDL-C水平比普通人低15%～28%。因此，PCSK9是膽固醇代謝途徑中的重要調(diào)節(jié)因子。抑制PCSK9表達(dá)水平或活性可以顯著降低“壞”LDL-C 的水平。因此，PCSK9是開發(fā)抗高脂血癥藥物的有效靶點。
品系：B6/JGpt-Pcsk9em1Cin(hPCSK9)/Gpt
動物使用量：8~10只/組，3~5組
實驗階段：8~10 周
1. 研究概覽
圖1. B6-hPCSK9小鼠研究概覽。B6-hPCSK9小鼠可通過喂食高膽固醇飲食而發(fā)生高脂血癥。
2. hPCSK9人源化模型驗證數(shù)據(jù)
（1）hPCSK9 mRNA與mPCSK9 mRNA檢測
圖2. 在B6-hPCSK9小鼠（5周齡）的肝臟中，只有人源PCSK9 mRNA表達(dá)，而小鼠PCSK9 mRNA不表達(dá)。數(shù)據(jù)以Mean±SD展示，n=8。
（2）hPCSK9蛋白水平檢測
圖3. 在B6-hPCSK9小鼠的肝臟中檢測到hPCSK9蛋白，而在C57BL/6J小鼠（5周齡）的肝臟中未檢測到.
（3）LDLR蛋白水平檢測
圖4. C57BL/6J與B6-hPCSK9小鼠（5周齡）肝臟中LDLR表達(dá)無明顯差異。
（4）LDL-C水平檢測
圖5. C57BL/6J與B6-hPCSK9小鼠（8周齡）血漿LDL-C水平無顯著性差異.
3. hPCSK9人源化模型藥效測試數(shù)據(jù)
（1）藥物（evolocumab）干預(yù)飲食誘導(dǎo)的hPCSK9人源化小鼠后血脂水平下降
圖6. 單次尾靜脈注射exvolocumab（20mpk）可以顯著降低西方飲食喂養(yǎng)的B6-hPCSK9小鼠血漿LDL-C水平，但在西方飲食喂養(yǎng)的C57BL/6J小鼠中沒有觀察到類似的效果。
使用unpaired two-tailed Student's t-test方法進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。**，p<0.01；***，p<0.001 與對照B6-hPCSK9+WD相比。
（2）exvolocumab顯著增加飲食誘導(dǎo)的hPCSK9人源化小鼠LDLR水平
圖7. 單次尾靜脈注射 evolocumab 單抗（20mpk）后3天，西方飲食喂養(yǎng)的B6-hPCSK9小鼠肝臟LDLR的表達(dá)水平顯著升高。
（3）測試藥物驗證數(shù)據(jù)
圖8. 測試藥物X（siRNA靶向hPCSK9）顯著降低了WD喂養(yǎng)的B6-hPCSK9小鼠的血漿LDL-C水平。數(shù)據(jù)以Mean±SD展示，n=5。
使用unpaired two-tailed Student's t-test方法進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。**，P<0.01；***，P<0.001。