B6-hPCSK9-UTR人源化模型及其藥效評價
隨著生活水平的提高，人們飲食結(jié)構(gòu)的改變，高脂血癥( hyperlipidemia，HLP)?發(fā)病率越來越高，HLP?嚴(yán)重危害著人類的身體健康，因為長期血脂過高會引發(fā)機體代謝紊亂，進(jìn)而產(chǎn)生動脈粥樣硬化、冠心病、心肌梗死等心腦血管疾病。因此，對高脂血癥的預(yù)防和相關(guān)治療藥物開發(fā)尤為重要。
PCSK9是一種已知的分泌因子，可負(fù)向調(diào)節(jié)細(xì)胞膜上LDLR的表達(dá)水平。PCSK9主要在肝組織中表達(dá)。分泌的PCSK9與LDLR結(jié)合，在溶酶體的作用下降解。對人類PCSK9基因的研究表明，PCSK9功能獲得性突變與家族性高脂血癥有關(guān)，PCSK9功能喪失性突變的LDL-C水平比普通人低15%～28%。因此，PCSK9是膽固醇代謝途徑中的重要調(diào)節(jié)因子。抑制PCSK9表達(dá)水平或活性可以顯著降低“壞”LDL-C 的水平。因此，PCSK9是開發(fā)抗高脂血癥藥物的有效靶點。
1. 研究概覽
圖1. B6-hPCSK9-UTR小鼠研究概覽。B6-hPCSK9-UTR小鼠可通過喂食高膽固醇飲食而發(fā)生高脂血癥。
2. hPCSK9人源化模型基礎(chǔ)驗證
（1）hPCSK9 mRNA與mPCSK9 mRNA檢測
圖2. 5周齡人源化B6-hPCSK9-UTR小鼠肝臟中僅高表達(dá)人源PCSK9 mRNA而不表達(dá)鼠源PCSK9 mRNA。數(shù)據(jù)以Mean±SD展示，n=2。
（2）hPCSK9蛋白檢測
圖3. 5周齡B6-hPCSK9-UTR小鼠肝臟中表達(dá)人源PCSK9蛋白，而C57BL/6J小鼠中沒有表達(dá)人源PCSK9蛋白表達(dá)。
（3）肝臟LDLR檢測
圖4. 5周齡B6-hPCSK9-UTR小鼠肝臟中LDLR蛋白的表達(dá)水平高于C57BL/6J小鼠。
（4）血液LDL-C水平檢測
圖5. 6周齡B6-hPCSK9-UTR小鼠血液中LDL-C水平略低于野生型C57BL/6J小鼠。數(shù)據(jù)以Mean±SD展示，n=28~33。****, p<0.0001 by unpaired t test.
3. hPCSK9人源化模型藥效驗證
（1）基于B6-hPCSK9-UTR人源化小鼠的小核酸藥物藥效驗證
圖6. 單次皮下注射Inclisiran（3mpk）可顯著降低常規(guī)飲食喂養(yǎng)的B6-hPCSK9-UTR小鼠的血漿hPCSK9水平。
圖7. 單次皮下注射Inclisiran（6mpk）可顯著降低西方飲食喂養(yǎng)的B6-hPCSK9-UTR小鼠的血漿LDL-C水平。