GITR( glucocorticoid-induced TNFR-related protein)是TNF受體超家族成員，在包括T細(xì)胞在內(nèi)的多種細(xì)胞表達(dá)，T細(xì)胞激活后其表達(dá)量上調(diào)，是T細(xì)胞的共刺激信號^[1]。其配體GITRL，主要表達(dá)在DC細(xì)胞，巨噬細(xì)胞和B細(xì)胞上，GITR/GITRL具有許多重要的功能，在調(diào)控T細(xì)胞增殖，抗腫瘤及自身免疫疾病方面具有重要作用^[3,4]；臨床前研究表明，在部分實(shí)性腫瘤的治療中，GITR激動劑、與PD-1/PD-L1抑制劑或者CTLA-4抑制劑聯(lián)用等，都表現(xiàn)出非常樂觀的效果。在臨床癌癥模型中，針對GITR通路的研究具有廣闊前景 ^[2]。

構(gòu)建策略：集萃藥康將BALB/c-hPD1小鼠的GITR的編碼區(qū)替換為人源GITR，成功構(gòu)建了獲得的BALB/c-hPD1/hGITR模型是篩選和評價人PD1抑制劑，anti-GITR及聯(lián)合用藥的理想動物模型。

1. BALB/c- hPD1/hGITR：hGITR抗體BMS986156 analogue藥效實(shí)驗(yàn)

在BALB/c-hPD1/hGITR小鼠模型皮下接種CT26腫瘤細(xì)胞系后測試抗人PD1抗體和GITR抗體的腫瘤抑制藥效。

Anti-GITR antibody：BMS986156 analogue

左圖：小鼠腫瘤生長曲線  右圖：小鼠體重變化曲線

基于BALBc-hPD1/hGITR小鼠皮下接種CT26.WT模型的體內(nèi)藥效實(shí)驗(yàn)。對數(shù)生長期的小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞 CT26.WT皮下接種 BALB/c-hPD1/hGITR 小鼠，待腫瘤生長至平均體積約100 mm³ 時，隨機(jī)分為PBS組， anti-GITR Ab 單藥組，Keytruda 單藥組及anti-GITR Ab + Keytruda 聯(lián)合給藥組(n=7)。每周兩次給藥，共給藥6次。數(shù)據(jù)以Mean ± SEM形式呈現(xiàn)。

結(jié)果顯示：anti-GITR Ab 治療組和Keytruda 治療組，其腫瘤體積的抑制率（TGI）分別為46.60%、38.33%，顯示對腫瘤的生長有一定的抑制作用；聯(lián)合用藥組anti-GITR Ab + Keytruda 對腫瘤的生長有較為明顯的抑制作用，其TGI為62.28%。

結(jié)果表明：BALBc-hPD1/hGITR小鼠是篩選和評價靶向人PD1，GITR抗體及聯(lián)合用藥的理想動物模型。

參考文獻(xiàn)

[1].Knee, Deborah A., Becker Hewes, and Jennifer L. Brogdon. “Rationale for anti-GITR cancer immunotherapy.” European journal of cancer 67 (2016): 1-10.

[2].Placke, Theresa, Hans-Georg Kopp, and Helmut Rainer Salih. “Glucocorticoid-induced TNFR-related (GITR) protein and its ligand in antitumor immunity: functional role and therapeutic modulation.” Clinical and Developmental Immunology 2010 (2010).

[3].Clouthier, Derek L., and Tania H. Watts. “Cell-specific and context-dependent effects of GITR in cancer, autoimmunity, and infection.” Cytokine & growth factor reviews 25.2 (2014): 91-106.

[4].Tigue, Natalie J., et al. “MEDI1873, a potent, stabilized hexameric agonist of human GITR with regulatory T-cell targeting potential.” Oncoimmunology 6.3 (2017): e1280645.