CD137人源化模型體內(nèi)藥效實驗
CD137（4-1BB，TNFRSF9）屬腫瘤壞死因子受體超家族成員，I型跨膜蛋白。在活化的CD4+T、CD8+T細(xì)胞表面表達(dá)，與CD137L結(jié)合構(gòu)成T細(xì)胞共刺激信號[1]。CD137主要在T細(xì)胞的免疫應(yīng)答中發(fā)揮作用，可以協(xié)同CD28在免疫后期提供共刺激信號以及T細(xì)胞的存活信號，在維持免疫應(yīng)答、抵抗免疫細(xì)胞凋亡、減少抗原特異性免疫細(xì)胞的清除以及增強(qiáng)免疫記憶方面發(fā)揮重要作用。CD137能夠刺激NK細(xì)胞增殖及IFNγ產(chǎn)生[2]，通過促進(jìn)細(xì)胞因子產(chǎn)生及B7上調(diào)表達(dá)介導(dǎo)DC活化[3]; 同時，CD137能夠保護(hù)T細(xì)胞免于活化誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡（activation-induced cell death，AICD）[1]。另外，CD137表達(dá)于腫瘤組織血管壁，CD137L表達(dá)于多種人體腫瘤組織細(xì)胞表面，CD137/CD137L在腫瘤微環(huán)境中發(fā)揮重要作用。
構(gòu)建策略：集萃藥康將BALB/c及C57BL/6小鼠的CD137基因編碼胞外區(qū)的部分替換為相應(yīng)的人源基因序列，而胞內(nèi)區(qū)則保留完整的鼠源序列，成功構(gòu)建了CD137人源化小鼠模型，包括單人源化小鼠BALB/c-hCD137及C57BL/6-hCD137，雙人源化小鼠BALB/c-hPD1/hCD137及C57BL/6-hPD1/hCD137，三人源化小鼠BALB/c-hPD1/hPDL1/hCD137。CD137人源化小鼠模型可用于人CD137激動劑的藥效評價及安全性評價。
1. BALB/c-hPD1/hPDL1/hCD137：Urelumab類似物和Keytruda藥效實驗
在BALB/c-hPD1/hPDL1/hCD137小鼠模型皮下接種CT26-hPDL1(Tg)-mPDL1(KO)腫瘤細(xì)胞后測試抗人CD137抗體Urelumab類似物和抗人PD1抗體的腫瘤抑制藥效。
小鼠腫瘤生長曲線
基于BALB/c-hPD1/hPDL1/hCD137小鼠皮下接種CT26-hPDL1(Tg)-mPDL1(KO)模型的體內(nèi)藥效試驗。將對數(shù)生長期的結(jié)腸癌細(xì)胞CT26-hPDL1(Tg)-mPDL1(KO)接種至6-8周齡BALB/c-hPD1/hPDL1/hCD137人源化小鼠皮下，待腫瘤生長至平均體積100 mm3時隨機(jī)分為PBS組、Keytruda組、Urelumab analogue組及Keytruda與Urelumab analogue聯(lián)合給藥組 (n=8)，并使用相應(yīng)的藥物進(jìn)行治療。每周給藥2次，共給藥5次。數(shù)據(jù)以Mean ± SEM形式呈現(xiàn)。
結(jié)果顯示： Keytruda組和Urelumab analogue單藥組的腫瘤體積抑制率（TGI）分別為69.68%和72.21%；Keytruda與Urelumab analogue聯(lián)合用藥組的TGI為87.22%，各給藥組均對腫瘤的生長有顯著的抑制作用，且聯(lián)合給藥組抑制作用更顯著。
結(jié)果表明： BALB/c-hPD1/hPDL1/hCD137小鼠可以用來評價人源CD137抗體、PD-1/PD-L1抗體及聯(lián)合用藥的抗腫瘤藥效作用。
參考文獻(xiàn)
[1]
Cannons JL, et al. 4-1BB ligand induces cell division, sustains
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similar efficacy. J.Immunol. 2001; 167:1313?1324.
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