以NCG為背景通過基因編輯技術(shù)將H2相關(guān)基因敲除，破壞MHCI類和II類分子，得到NCG-MHC-dKO品系小鼠，該小鼠結(jié)合了嚴(yán)重的免疫缺陷突變(Scid)、Il2rγ基因敲除和MHC I/II分子缺乏的特點(diǎn)，最 大限度減緩移植物抗宿主?。℅vHD）反應(yīng)并延長實(shí)驗(yàn)的窗口期，并保證免疫細(xì)胞比例正常和抗體分子評(píng)價(jià)的準(zhǔn)確性?？捎糜谥苽淙嗽椿∈竽Ｐ腿鏟BMC或HSC重建、用于人源細(xì)胞組織移植、接種人源腫瘤用于篩選相關(guān)藥物、用于人類造血系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)研究、對(duì)移植物抗宿主病(GvHD)相關(guān)研究。

應(yīng)用領(lǐng)域

1. 用于制備免疫系統(tǒng)人源化小鼠模型

2. 用于人源細(xì)胞組織移植

3. 接種人源腫瘤用于篩選相關(guān)藥物

4. 用于人類造血系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)研究

5. 對(duì)移植物抗宿主病(GvHD)相關(guān)研究

數(shù)據(jù)模型

1. 人源PBMC重建 

圖1. 人源PBMC重建后小鼠體重變化統(tǒng)計(jì)

NCG和NCG-MHC-dKO小鼠在注射人源 PBMC后，觀察小鼠體重變化，結(jié)果發(fā)現(xiàn)敲除MHCI/MHCII后可顯著改善PBMC重建后因GvHD發(fā)生導(dǎo)致的小鼠體重下降情況。

圖2. 人源PBMC重建后小鼠生存情況統(tǒng)計(jì)

NCG和NCG-MHC-dKO小鼠在注射人源 PBMC后，觀察小鼠生存變化，結(jié)果發(fā)現(xiàn)敲除MHCI/MHCII后可顯著改善PBMC重建后因GvHD發(fā)生導(dǎo)致的小鼠死亡情況。

 圖3. 人源PBMC重建后小鼠GvHD發(fā)生情況統(tǒng)計(jì)

NCG和NCG-MHC-dKO小鼠在注射人源PBMC后，觀察小鼠的體重、皮膚、毛發(fā)、姿態(tài)以及活動(dòng)狀態(tài)以評(píng)定GvHD發(fā)生情況，結(jié)果發(fā)現(xiàn)敲除MHCI/MHCII后可顯著降低PBMC重建后GvHD的產(chǎn)生。

圖4. 人源PBMC的重建效率

在NCG和NCG-MHC-dKO小鼠注射人源PBMC后，在NCG及NCG-MHC-dKO小鼠的均能較好的進(jìn)行免疫重建，且重建的細(xì)胞主要以人源T細(xì)胞為主，重建效率最 高可達(dá)50%左右。

圖5. 人源PBMC的重建后hCD4和hCD8的細(xì)胞水平

在NCG和NCG-MHC-dKO小鼠注射人源PBMC后，與NCG鼠相比，NCG-MHC-dKO小鼠的hCD4細(xì)胞呈下降趨勢(shì)，hCD8細(xì)胞呈上升趨勢(shì)。

2. hIgG半衰期

圖6. 在NCG、NCG-B2M、NCG-MHCI-KO和NCG-MHC-dKO小鼠血清中的人IgG半衰期變化

與NCG小鼠相比，NCG-B2M小鼠的hIgG清除速度更快，而NCG-MHC-dKO小鼠的hIgG半衰期與NCG小鼠相似。

3.  藥效驗(yàn)證

CD3 T細(xì)胞功能及抗體藥物研究：

通過移植人源PBMC，NCG-MHC-dKO小鼠模型為研究CD3 T細(xì)胞的激活、增殖和功能提供了獨(dú)特的機(jī)會(huì)。研究人員可以利用該模型評(píng)估不同CD3 T細(xì)胞亞群的功能，進(jìn)一步探索其在GvHD發(fā)展中的作用，并為新的免疫治療策略的開發(fā)提供重要的信息。此外，NCG-MHC-dKO小鼠模型還可用于評(píng)估CD3 T細(xì)胞功能抗體藥物的療效和安全性，為抗腫瘤免疫治療的研究和開發(fā)提供了有力的支持。

圖7. Talquetamab在人源PBMC重建后的NCG-MHC-dKO模型中藥效評(píng)價(jià)

Talquetamab能顯著抑制NCG-MHC-dKO小鼠體內(nèi)的腫瘤生長，并且治療期間小鼠體重及狀態(tài)穩(wěn)定，說明NCG-MHC-dKO模型是評(píng)價(jià)CD3雙抗藥物的理想模型。

圖8. Tecentriq在人源PBMC重建后的NCG-MHC-dKO模型中藥效評(píng)價(jià)

Tecentriq（PDL1抑制劑）。從用藥開始的30天內(nèi)監(jiān)測(cè)體重和腫瘤的測(cè)量。結(jié)果發(fā)現(xiàn)Tecentriq能顯著抑制NCG-MHC-dKO小鼠體內(nèi)的MDA-MB-231腫瘤生長。

結(jié)論：

NCG-MHC-dKO小鼠模型作為一種新的實(shí)驗(yàn)工具，展示了在緩解人源PBMC異體移植GvHD、保持IgG抗體半衰期以及研究CD3T細(xì)胞功能及抗體藥物方面的潛力。該模型為GvHD的研究提供了新的途徑，并為免疫治療策略的發(fā)展提供了重要的支持。進(jìn)一步的研究和應(yīng)用將進(jìn)一步揭示該模型的潛力和臨床價(jià)值。