與構(gòu)建DIO小鼠實(shí)驗(yàn)類似，即便是基因改造的自發(fā)模型小鼠，其生理指標(biāo)也會在個(gè)體間存在差異，比如BKS-DB小鼠在藥效實(shí)驗(yàn)前需要進(jìn)行體重和血糖等指標(biāo)檢測，會有部分個(gè)體不符合入組要求（體重太輕或血糖不達(dá)標(biāo)）。此外在手術(shù)/誘導(dǎo)類造模實(shí)驗(yàn)過程中可能存在動(dòng)物意外死亡的情況，因此也需要額外訂購小鼠作為備用。

BKS-DB是經(jīng)典的糖尿病模型，大部分小鼠會出現(xiàn)腎病并發(fā)癥，但嚴(yán)重程度也不一致，可以結(jié)合體重和血糖等指標(biāo)綜合判斷。一般情況下，部分小鼠在16W開始出現(xiàn)嚴(yán)重的腎臟并發(fā)癥，表現(xiàn)為腎臟組織粘連，無法取出完整腎臟做病理學(xué)檢測或小鼠死亡的情況。部分血糖較高小鼠可能會在12W甚至更早出現(xiàn)類似嚴(yán)重腎臟并發(fā)癥。小鼠出現(xiàn)了糖腎并發(fā)癥后，腎臟內(nèi)部結(jié)構(gòu)被破環(huán)，影響腎臟過濾、重吸收、分泌等功能，尿液會呈現(xiàn)乳白色，質(zhì)地較粘稠。如進(jìn)行血糖相關(guān)研究，建議在實(shí)際入組數(shù)量的基礎(chǔ)上額外采購20%~30%以上的富余量，或者選擇較早周齡取材。糖腎解剖表型示例如下，隨著病程的發(fā)展，實(shí)際剖檢情況可能略有差異。

一般對于腎臟病變的評價(jià)指標(biāo)有病理切片、血生化和尿生化，其中尿生化數(shù)據(jù)是相對最不穩(wěn)定的，建議結(jié)合其他兩項(xiàng)檢測來進(jìn)行判斷。如進(jìn)行糖腎相關(guān)研究，需嚴(yán)格設(shè)置入組指標(biāo)，選擇合適的小鼠入組實(shí)驗(yàn)。另外，易出現(xiàn)批次間差異，建議批次內(nèi)比較。

4~8周齡期間是db/db小鼠的糖尿病發(fā)病期，在此期間db/db小鼠血糖水平和糖代謝紊亂程度會出現(xiàn)個(gè)體間的差異，但到8周齡后幾乎所有db/db小鼠的發(fā)病狀態(tài)趨于一致。db/db小鼠的高血糖癥狀并不會像ob/ob小鼠那樣在3~4月齡逐漸回落，而是會一直保持很高的血糖水平，可能的原因是db/db小鼠的胰島在經(jīng)歷代償性增生以后會逐漸進(jìn)入到失代償階段（胰島出現(xiàn)萎縮），胰島素的分泌水平在3~4月齡期間會逐漸下降，這進(jìn)一步加劇了血糖調(diào)控的失衡，并且db/db小鼠這樣的胰島功能變化與人類2型糖尿病患者的變化非常相似，因此不同周齡的db/db小鼠可以模擬人類2型糖尿病從早期到中晚期的不同的病變特點(diǎn)，這也使db/db小鼠成為在2型糖尿病研究中使用最廣泛的經(jīng)典遺傳模型。

4~8W為血糖快速升高期，該期間小鼠血糖浮動(dòng)范圍較廣，不同個(gè)體間的血糖差異也較大，如果采用此周齡段的小鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，建議實(shí)驗(yàn)前嚴(yán)格測血糖分組，且實(shí)驗(yàn)結(jié)果可能會有一定的誤差。

8W以后血糖值漸漸趨于一致，但仍然存在個(gè)體差異導(dǎo)致血糖不均一的情況，建議采購20% ~ 30%的富余量。發(fā)鼠前不對血糖進(jìn)行質(zhì)控，如客戶實(shí)驗(yàn)對于血糖要求比較高，可以考慮付費(fèi)測血糖后發(fā)出，方法為斷尾測血糖，默認(rèn)不打耳標(biāo)，如有打耳標(biāo)需求，須在訂購前溝通。

另外，也存在測量不準(zhǔn)確的問題，引起血糖不準(zhǔn)的因素有很多，如環(huán)境刺激、小鼠狀態(tài)、測量時(shí)間，飽腹程度（禁食時(shí)間）等都會影響血糖測定。建議飼養(yǎng)在SPF級動(dòng)物房、保證飲水和飲食充足、勤換墊料、減少應(yīng)激、統(tǒng)一采血方式和測量時(shí)間，接收到小鼠后需要進(jìn)行5~7天適應(yīng)性飼養(yǎng)再進(jìn)行檢測和實(shí)驗(yàn)，以減小誤差。

一般眼眶或頜下取血的方式對BKS-DB小鼠進(jìn)行采血（30ul左右），分離血漿，稀釋后使用血生化儀檢測，需要注意的是，血生化檢查血糖值和真實(shí)值直接存在差異。因涉及創(chuàng)傷，這種方法檢測血糖的間隔建議在2周左右。此外這種方法不適合于BKS-DB小鼠GTT檢測，因?yàn)槎虝r(shí)間內(nèi)頻繁采血會對動(dòng)物產(chǎn)生強(qiáng)烈的應(yīng)激，造成血糖數(shù)據(jù)不穩(wěn)定?？梢酝ㄟ^增加糖化血紅蛋白檢測來反映血糖水平。

可以做，但是BKS-DB小鼠本底情況下血糖值很高，在這種情況下進(jìn)行常規(guī)OGTT實(shí)驗(yàn)會造成15-90min間的采血點(diǎn)血糖值超過血糖儀檢測上限，無法判斷藥物的潛在效果。

不一定，B6小鼠會有一定的比例喂不胖，根據(jù)我們的實(shí)驗(yàn)統(tǒng)計(jì)，大致比例為25%，因此藥康在造模時(shí)會放大25%富余量小鼠，保障提供的小鼠均體重達(dá)標(biāo)，在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)時(shí)需注意訂購富余量小鼠。

這種情況是會出現(xiàn)的，由于細(xì)胞特性的不同、在動(dòng)物體內(nèi)生長環(huán)境和培養(yǎng)皿環(huán)境的不同，會帶來細(xì)胞不同生長趨勢的結(jié)果，也和細(xì)胞接種量、動(dòng)物選擇性有關(guān)。所以，建議對于新改造的或新購買的細(xì)胞，不要直接開展大規(guī)模的藥效，而是先做小規(guī)模的成瘤性測試，摸索成瘤條件，避免造成不必要的損失。

可以的。客戶需要提供支原體檢測報(bào)告，我司會做支原體檢測復(fù)核。因支原體是SPF動(dòng)物房禁止帶入的微生物，也會對成瘤性測試或藥效實(shí)驗(yàn)帶來不準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果?？蛻艨商峁┰摷?xì)胞的小樣，支原體檢測報(bào)告為陰性的時(shí)候，方可啟動(dòng)正式實(shí)驗(yàn)，正式實(shí)驗(yàn)細(xì)胞注射后還會留取小樣再進(jìn)行復(fù)核。

亞致死劑量的清髓（清除的不全是干細(xì)胞），目的是為了提高h(yuǎn)uHSC移植后小鼠體內(nèi)的重建水平。PBMC為外周血單個(gè)核細(xì)胞，該方法可以在較短時(shí)間內(nèi)實(shí)現(xiàn)快速的免疫系統(tǒng)重建，小鼠不需要提前清髓處理。