技術(shù)資源
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小鼠輻照注意事項
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小鼠全身性輻照,尤其是X-RAY輻照,可能會出現(xiàn)輻照誘導(dǎo)的胃腸道綜合征(Radiation-induced gastrointestinal syndrom),主要表現(xiàn):小鼠腸壁變薄,胃腸道內(nèi)的微生物侵襲引起胃腸道彌散性出血。另外,也可以考慮輻照前>7d予以抗生素處理(集萃藥康HSC重建小鼠生產(chǎn)目前未使用),輻照后密切關(guān)注動物的飲食、飲水及體重情況,必要時給予碎飼料或營養(yǎng)膠輔助進(jìn)食,補(bǔ)充營養(yǎng)。
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造NCG小鼠GvHD模型,接種量是多少,多久發(fā)???
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不同donor差異比較大,需要進(jìn)行廣泛的donor篩選。一般接種劑量1E7-2E7,發(fā)病時間7-21d都有可能,主要看donor的差異。這個篩選過程成本比較高,我司有篩選好的donor,客戶可以考慮直接在我司開展藥效實(shí)驗。
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BKS-db適合做減重藥物效果評估嗎?
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BKS-db不太適合做減重的評估,對BKS-db使用減重藥物一般只會緩解小鼠體重增長的趨勢。減重評估用DIO比較好,或者B6-Alms1-del(不會因為嚴(yán)重的并發(fā)癥出現(xiàn)模型組體重降低和死亡的問題)。
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為什么收到貨時包裝盒膠帶處起霧?
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膠帶處出現(xiàn)起霧現(xiàn)象,可能涉及多個因素。首先,考慮物理因素。膠帶在粘貼過程中,可能由于紙盒表面或膠帶本身的微小不平整,導(dǎo)致在局部形成了微小的密閉空間。當(dāng)外界環(huán)境濕度較高時,這些空間內(nèi)的空氣可能會因為溫差或濕度變化而形成凝結(jié)水,表現(xiàn)為起霧現(xiàn)象。其次紙盒在運(yùn)輸過程中經(jīng)歷了的溫度變化,或者環(huán)境濕度較高,這都可能導(dǎo)致膠帶處出現(xiàn)起霧現(xiàn)象。
一般來說,起霧現(xiàn)象本身并不會對動物質(zhì)量產(chǎn)生直接影響。起霧主要是由于環(huán)境濕度和溫差等外部因素導(dǎo)致的物理現(xiàn)象,而非產(chǎn)品本身的問題。
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為什么收到貨時外箱潮濕?
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運(yùn)輸過程中由于小鼠聚集在紙盒一角,在固定位置排尿,小鼠尿液會滲透紙箱上;或者由于紙箱邊緣觸碰到果凍,果凍緩慢析出水分滲透紙箱上導(dǎo)致外箱潮濕;或者由于粘合的膠帶起霧,進(jìn)而造成的局部潮濕。
一般來說,運(yùn)輸盒局部潮濕會出現(xiàn)在膠帶粘合內(nèi)側(cè),如果潮濕部位未超過膠帶邊緣,則不會對動物質(zhì)量產(chǎn)生影響。
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為什么收到貨時紙箱內(nèi)部潮濕?
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主要由于小鼠尿液和果凍緩慢析出水分造成,紙箱內(nèi)的刨花主要起到保溫及筑巢的作用,吸水性較弱,小鼠尿液和果凍水分會滲透紙箱。潮濕只要不透出運(yùn)輸盒及膠帶邊緣,不會對動物質(zhì)量造成影響。
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合格證丟失/重開相關(guān)問題?
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如合格證丟失,可聯(lián)系我司開證人員補(bǔ)打印。如需變更合格證信息,到貨24h內(nèi)反饋我司開證人員,可按要求重新出具,原合格證銷毀作廢。
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基因編輯小鼠模型的敲除/表達(dá)檢測
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由于基因表達(dá)和調(diào)控的復(fù)雜性和多樣性,客戶獲得小鼠模型后,在大量擴(kuò)繁前,應(yīng)先對模型中目的基因的敲除/表達(dá)情況進(jìn)行檢測。可以通過 RT-PCR、Western blot、免疫組化等方法在 RNA 水平或者蛋白水平進(jìn)行基因的敲除/表達(dá)檢測。
檢測結(jié)果確認(rèn)后,再進(jìn)行大量的擴(kuò)繁及表型實(shí)驗等。
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BAC轉(zhuǎn)基因的優(yōu)勢和適用范圍是什么?
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BAC(Bacterial Artificial Chromsomes,細(xì)菌人工染色體)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是,攜帶的基因組片段大小為100-200kb,可以保留完整的基因及基因的調(diào)控區(qū)域,可以更加真實(shí)的模擬體內(nèi)基因的表達(dá)情況。
在以下情況下可選擇該技術(shù)方案:
① 無法設(shè)計原位敲入方案
② 基因的調(diào)控區(qū)域未知
③ 無法確認(rèn)啟動子的組織特異性或者細(xì)胞特異性,或無可用的啟動子
④ 需要表達(dá)基因很長,需表達(dá)基因的多個轉(zhuǎn)錄本或是全部家族基因時
⑤ 可與KO配合使用,實(shí)現(xiàn)基因的人源化/其他動物源化(通過引入BAC上的調(diào)控序列模擬來源動物目的基因的表達(dá)調(diào)控)
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