你是否經(jīng)歷過(guò)這樣的絕望時(shí)刻？精心飼養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)小鼠突然集體狀態(tài)異常，數(shù)月實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)毀于一旦——?jiǎng)e慌，今天我們將介紹實(shí)驗(yàn)室里的生物監(jiān)測(cè)員：哨兵鼠。它們并非普通實(shí)驗(yàn)鼠，而是活體監(jiān)測(cè)工具，能提前預(yù)警微生物污染，為你的科研數(shù)據(jù)保駕護(hù)航。

據(jù)復(fù)旦大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)部2023年在《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與比較醫(yī)學(xué)》發(fā)表的研究顯示，在2021年至2023年對(duì)供應(yīng)商來(lái)源的大鼠和小鼠抽檢中，微生物監(jiān)測(cè)總體合格率為80.36%，即仍有近20%的動(dòng)物存在微生物污染情況，這類隱形污染不僅會(huì)擾亂實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的免疫與代謝水平，還會(huì)顯著影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。而哨兵鼠能在污染初期發(fā)出警報(bào)，最大限度降低損失。

先搞懂：誰(shuí)是合格的健康哨兵？

想要哨兵鼠發(fā)揮作用，首先得明確它的核心定位：不攜帶待監(jiān)測(cè)的特定病原及抗體，且需與被監(jiān)測(cè)動(dòng)物同一種屬，只有這樣才能準(zhǔn)確反映鼠群的病原感染情況。無(wú)論是后續(xù)篩選還是管理，都要圍繞這個(gè)核心定位展開(kāi)。

篩選哨兵候選人：年齡、性別、品系有講究

選對(duì)哨兵鼠，監(jiān)測(cè)就成功了一半，篩選時(shí)要盯緊三個(gè)關(guān)鍵維度：

• 年齡：避開(kāi)太老或太嫩

  不能隨便選小鼠，一般要在4-6周齡時(shí)引入，飼養(yǎng)到10-12 周齡再進(jìn)行檢測(cè)。年紀(jì)太大的小鼠可能出現(xiàn)假陰性結(jié)果，直接影響監(jiān)測(cè)準(zhǔn)確性，這一點(diǎn)必須嚴(yán)格把控。

  
  

• 性別：優(yōu)先選雌性

  雌性小鼠不僅能避免打斗，還能防止計(jì)劃外交配造成的遺傳學(xué)污染，減少額外的飼養(yǎng)風(fēng)險(xiǎn)，是更穩(wěn)妥的選擇。

  
  

• 品系：按需匹配，兼顧性價(jià)比

  日常監(jiān)測(cè)常用免疫正常的封閉群小鼠（比如 ICR 品系），這類小鼠容易獲得、價(jià)格低廉，對(duì)病原體易感且抵抗力強(qiáng)，能產(chǎn)生良好的免疫應(yīng)答；如果實(shí)驗(yàn)有特殊需求（如免疫相關(guān)研究），或者您所監(jiān)測(cè)的種群是免疫缺陷小鼠，也可以選擇免疫缺陷鼠作為哨兵鼠。

同時(shí)，為了避免遺傳污染風(fēng)險(xiǎn)，我們可以結(jié)合動(dòng)物的毛發(fā)花色進(jìn)行區(qū)別。如一個(gè)架子都是白色毛發(fā)的免疫正常封閉群小鼠，我們可以選擇黑色的B6或者其他免疫正常品系進(jìn)行區(qū)分。

讓哨兵鼠接觸病原：兩種方式各有側(cè)重

選好哨兵鼠后，怎樣讓它們接觸被監(jiān)測(cè)鼠群的潛在病原？主要有兩種方法，需根據(jù)場(chǎng)景靈活使用：

• 直接接觸法：將哨兵鼠與被監(jiān)測(cè)鼠合養(yǎng)，適用于檢疫期或小群體監(jiān)測(cè)。缺點(diǎn)是可能引發(fā)打斗，且難以覆蓋多籠動(dòng)物。

  
  

• 臟墊料法：將使用過(guò)的墊料放入哨兵鼠籠中，即100%臟墊料接觸法。需注意暴露時(shí)間不超過(guò)3個(gè)月（避免因年齡增長(zhǎng)導(dǎo)致病原敏感性下降），缺點(diǎn)是對(duì)于氣溶膠傳播的病原微生物監(jiān)測(cè)有限。

哨兵鼠的崗位管理：點(diǎn)位、記錄、流程都要規(guī)范

哨兵鼠不是隨便放就行，崗位設(shè)置和監(jiān)測(cè)流程有明確規(guī)范，一步都不能錯(cuò)：

• 監(jiān)測(cè)點(diǎn)位：重點(diǎn)盯緊排風(fēng)口

廢氣排出口是空氣傳播病原的關(guān)鍵監(jiān)測(cè)點(diǎn)，必須在這里安放哨兵鼠籠，輔助捕捉可能通過(guò)空氣擴(kuò)散的病原，彌補(bǔ)臟墊料法的監(jiān)測(cè)盲區(qū)。

• 標(biāo)識(shí)與記錄：每只哨兵鼠都有檔案

每只哨兵鼠要用特殊顏色的籠牌區(qū)分，避免混淆；同時(shí)要做好詳細(xì)記錄，包括籠位坐標(biāo)、小鼠品系、生日、放置日期、負(fù)責(zé)人、AP 號(hào)等信息，方便后續(xù)追溯。

• 監(jiān)測(cè)流程：按節(jié)奏操作

每次監(jiān)測(cè)從哨兵鼠籠內(nèi)取1只檢測(cè)：若結(jié)果合格，補(bǔ)充2只新哨兵鼠（同時(shí)淘汰年齡偏大的個(gè)體），或在下一輪檢測(cè)時(shí)取新補(bǔ)的1只，同時(shí)淘汰年齡偏大的個(gè)體；若結(jié)果可疑，立即復(fù)檢籠內(nèi)剩余的哨兵鼠，避免漏判。

檢測(cè)環(huán)節(jié)：頻率、項(xiàng)目都有硬標(biāo)準(zhǔn)

哨兵鼠的檢測(cè)不能隨心所欲，頻率和項(xiàng)目都要按標(biāo)準(zhǔn)來(lái)：

• 檢測(cè)頻率：季度一次，特殊情況加頻

按FELASA建議及國(guó)內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)，每季度至少檢測(cè)一次；若設(shè)施頻繁引入新動(dòng)物，可適當(dāng)提高頻次。

• 檢測(cè)項(xiàng)目：按GB14922標(biāo)準(zhǔn)全覆蓋

檢測(cè)依據(jù)《GB14922-2022 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 微生物、寄生蟲(chóng)學(xué)等級(jí)及監(jiān)測(cè)》開(kāi)展，同時(shí)可以結(jié)合動(dòng)物房的業(yè)務(wù)類型和側(cè)重點(diǎn)，綜合性考慮需要排查的病原微生物。

管理核心與意義：少鼠高效，守護(hù)實(shí)驗(yàn)安全

哨兵鼠監(jiān)測(cè)體系的關(guān)鍵在于：以最少數(shù)量實(shí)現(xiàn)有效監(jiān)測(cè)，控制成本的同時(shí)確保暴露充分。其意義不僅在于病原篩查，更能提升實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理的規(guī)范性，及時(shí)阻斷傳播鏈，保障數(shù)據(jù)真實(shí)性，從流程上預(yù)防感染事件復(fù)發(fā)。

每一只哨兵鼠都是實(shí)驗(yàn)安全的小衛(wèi)士，做好它們的篩選、管理和檢測(cè)，就是在為科研數(shù)據(jù)的可靠性保駕護(hù)航。這份哨兵管理手冊(cè)，趕緊收藏起來(lái)吧！

參考資料

https://mp.weixin.qq.com/s?__biz=MzI5Njk2NDkyMA==&mid=2247500272&idx=3&sn=92b120f3352e32856dcbc158e3443dcc&chksm=ed546a521720b5b41aec71372c217e61ec79ba865a9a333fb3a938f81ee78d045375a367c9f0#rd