在科研的廣袤天地中，動物實驗是生物科技領域不可或缺的一環(huán)。對于實驗動物外科手術而言，麻醉是首要且關鍵的第一步，它直接關系到實驗的成敗與動物福利的保障。但在實際操作中，這看似簡單的一步，卻讓不少同學頻頻踩坑。今天，我們就來詳細聊聊小鼠麻醉那些事兒，幫助大家順利跨越這一關鍵環(huán)節(jié)。

小鼠麻醉的常用方法及藥物選擇

（一）吸入麻醉法

1. 適用場景

吸入麻醉法常用于需快速誘導麻醉、精確控制麻醉深度、用時較長的外科手術及需快速蘇醒的動物實驗，如小鼠的活體成像、采血等。其優(yōu)勢在于起效快，并且麻醉深度可根據(jù)實驗需求靈活調整。例如，在進行小鼠短期生理指標測量時，吸入麻醉可以快速讓小鼠安靜，方便操作，結束后小鼠能迅速蘇醒，減少對動物身體的影響，安全性較高 ^[1]。

2. 常用藥物

吸入麻醉劑主要包括異氟烷、七氟烷等。以異氟烷為例，它具有呼吸刺激小、血氣分配系數(shù)低的特點，誘導迅速、麻醉平穩(wěn)且蘇醒快，是較為理想的麻醉劑。操作時需使用呼吸麻醉機：先將小鼠置于誘導箱內，以4%-5%的濃度進行誘導麻醉；待進入外科手術期（呼吸循環(huán)穩(wěn)定，反射抑制）后，將濃度降至1%-2%維持，并通過面罩或鼻錐持續(xù)供氣 ^[2]。

左圖：吸入麻醉設備；右圖：麻醉廢氣抽排凈化裝置

（二）注射麻醉法

1. 適用場景

注射麻醉法適用于時長1小時內的手術、不具備氣體麻醉條件的情況，或如解剖、組織取材等終點實驗。該方法麻醉效果穩(wěn)定，單次麻醉可持續(xù)30-60分鐘 [1]。

2. 常用藥物

氯胺酮 + 賽拉嗪：安全性高、可逆性強，適用于中短時手術（如開腹、植瘤）。常規(guī)劑量為氯胺酮80–100 mg/kg + 賽拉嗪5–10 mg/kg（腹腔注射）[3]。賽拉嗪為α2受體激動劑，具鎮(zhèn)靜、肌松和鎮(zhèn)痛作用，可增強麻醉效果并減少氯胺酮副作用；其拮抗劑阿替美唑可用于快速逆轉麻醉 [4]。

舒泰+賽拉嗪：推薦劑量為舒泰55–75 mg/kg + 賽拉嗪5–10 mg/kg（腹腔注射），外科麻醉時長約20–50分鐘。注意該方案存在藥物相互作用風險：與吩噻嗪類（如乙酰丙嗪）聯(lián)用會抑制心肺功能并導致低溫；與氯霉素合用影響代謝清除。價格較高，屬國家弱管制藥品，寵物臨床常用而易得，但實驗動物需謹慎評估不良反應。

阿佛丁（三溴乙醇）：常用劑量400 mg/kg（腹腔注射），麻醉維持約15–45分鐘。溶液穩(wěn)定性差，放置后易產生毒性物質且pH下降，顯著增加死亡率。不良反應包括胃腸液分泌增多、腹膜粘連、腸梗阻及呼吸心臟抑制；雌鼠敏感性更高。屬非醫(yī)用級麻醉劑，安全窗窄，需現(xiàn)配現(xiàn)用，并經獸醫(yī)與IACUC批準后使用。

（三）局部麻醉法

局部麻醉藥通過可逆性阻斷神經細胞膜上的電壓門控Na?通道，抑制沖動傳導，從而實現(xiàn)手術區(qū)域鎮(zhèn)痛。常用藥物如利多卡因和布比卡因，多通過粘膜表面（如鼻、眼）或局部浸潤注射給藥。

利多卡因的推薦劑量為4 mg/kg（相當于1%溶液0.4 mL/kg），起效快但作用時間短，總劑量不應超過7 mg/kg；布比卡因推薦劑量為1–2 mg/kg（0.25%溶液0.4–0.8 mL/kg），起效較慢但作用更持久，總劑量不宜超過6 mg/kg。

在手術切口等疼痛刺激前使用局麻藥，可作為重要的輔助鎮(zhèn)痛手段。與阿片類或非甾體抗炎藥等全身性鎮(zhèn)痛藥聯(lián)用，可構建多模式鎮(zhèn)痛方案，增強效果并減少全身用藥副作用。但由于單次給藥通常僅維持數(shù)小時，一般不推薦將其作為術后唯一的鎮(zhèn)痛方式，而應納入整體疼痛管理計劃，并嚴格注意用藥安全。

新手常遇到的麻醉失敗問題及原因剖析

（一）劑量計算失誤

許多新手在計算麻醉劑劑量時容易出現(xiàn)錯誤。小鼠的體重差異是影響麻醉劑量的關鍵因素，每增加1g體重，麻醉劑量可能就需要重新計算。例如，氯胺酮與賽拉嗪聯(lián)合用藥時，常按氯胺酮100mg/kg和賽拉嗪10mg/kg的劑量給藥。一只20g的小鼠需要氯胺酮2mg和賽拉嗪0.2mg，而一只30g的小鼠則需要氯胺酮3mg和賽拉嗪0.3mg。如果忽略了體重差異，按照固定劑量給藥，很可能導致麻醉過深或過淺。麻醉過深會抑制小鼠的呼吸和循環(huán)系統(tǒng)，甚至導致死亡；麻醉過淺則會使小鼠在實驗過程中蘇醒，影響實驗進行，還會給小鼠帶來痛苦^[2]。

（二）混合麻醉劑使用不當

使用氯胺酮與賽拉嗪等混合麻醉劑時，部分操作者易忽略其混合后的穩(wěn)定性問題。該類混合物易分解，必須現(xiàn)配現(xiàn)用。若提前配制并存放過久，藥物可能失效，導致麻醉效果不足，無法使小鼠達到所需麻醉深度[3]。

（三）術前準備不足

1. 環(huán)境因素

麻醉前需注意環(huán)境溫度。小鼠適宜溫度為20–26℃，若溫度過低，麻醉狀態(tài)下易出現(xiàn)低體溫。這是因為麻醉會抑制其體溫調節(jié)中樞，導致自我保溫能力下降。低體溫不僅影響生理狀態(tài)、延長蘇醒時間，還可能引起實驗數(shù)據(jù)偏差^[1]。

2. 禁食問題

小鼠因生理結構不易嘔吐，通常麻醉前無需禁食。但若誤操作而禁食過久，會因其新陳代謝快而導致體質下降，麻醉耐受性降低，從而增加麻醉風險^[4]。

符合動物福利和倫理審查要點的麻醉策略

（一）麻醉劑藥物選擇的考量

在選擇麻醉劑時，需充分考慮動物福利與倫理要求。例如，水合氯醛曾為常用麻醉劑，但后續(xù)研究表明其本質上屬于鎮(zhèn)靜催眠藥，鎮(zhèn)痛效果差、刺激性較強，且毒副作用較大，易引起動物呼吸抑制和心血管功能下降等問題，還會干擾實驗結果，不符合動物福利與倫理審查原則，因此目前多數(shù)實驗已不再采用^[5]。

三溴乙醇（阿佛?。╇m能提供有效的鎮(zhèn)痛（痛覺阻斷率>95%），符合減少動物痛苦的優(yōu)化原則，但其溶液穩(wěn)定性差、安全窗窄，并可能引起腹膜粘連等風險（詳見‘注射麻醉法’部分）。因此，使用必須格外謹慎，并需獲得倫理委員會批準。建議劑量：小鼠為1.25%濃度，0.18-0.19 mL/10g；大鼠為2.5%濃度，0.1 mL/10g。

三溴乙醇試劑瓶

（二）術后護理措施的重要性

1. 體溫維持

小鼠麻醉蘇醒期間需使用加熱墊維持體溫，成年小鼠的墊溫宜設置在35–37℃以確保有效復溫，避免低溫應激。注意不可將動物直接接觸熱源，應墊隔平板紙等材料，以防燙傷^[1]。

用加熱墊給蘇醒小鼠保溫實拍圖

2. 蘇醒監(jiān)測

應持續(xù)監(jiān)測小鼠直至完全恢復。蘇醒期間宜將小鼠置于鋪有紙巾（避免使用墊料）的干凈籠中，以降低氣道阻塞或肺炎風險。恢復過程中需持續(xù)保溫，待其可自主活動后再放回原籠，并提供飼料與飲水^[4]。若小鼠接受手術，為防止同籠伙伴啃咬縫線或損傷切口，可能需術后單獨飼養(yǎng)，該安排應提前在實驗方案中說明，并獲IACUC（實驗動物管理與使用委員會）批準^[5]。

小鼠麻醉是一項需要嚴謹對待的技術活，從麻醉方法和藥物的選擇，到避免常見的麻醉失敗問題，再到嚴格遵循動物福利和倫理審查要點，每一步都關乎實驗的順利開展和動物的福祉。希望同學們通過這篇指南，能夠在小鼠麻醉操作上更加得心應手，讓科研之路少一些阻礙，多一份保障。

參考文獻

[1] 孫敬方。動物實驗方法學 [M]. 北京：人民衛(wèi)生出版社，2001: 156-162.

[2] 魏泓。實驗動物學 [M]. 北京：科學出版社，2019: 213-218.

[3] Fish R E, Brown M A, Danneman P J, et al. Anesthesia and Analgesia in Laboratory Animals[M]. 2nd ed. San Diego: Academic Press, 2008: 345-351.

[4] National Research Council. Guide for the Care and Use of Laboratory Animals[M]. Washington, D C: The National Academies Press, 2011: 127-133.

[5] 中華人民共和國國家衛(wèi)生和計劃生育委員會。實驗動物福利倫理審查指南（GB/T 35892-2018）[S]. 北京：中國標準出版社，2018.

[6] Kitagawa Y, Tsuji T, Yamada K. Evaluation of tribromoethanol as an anesthetic agent for mice[J]. Experimental Animals, 2007, 56(2): 143-148.

[7] 實驗動物那些事兒. 《小鼠麻醉指導原則》. 2024.