從發(fā)情判斷到離乳管理,3大關鍵技巧讓鼠鼠繁育效率飆升

養(yǎng)鼠人懂的都懂:查栓白等、幼鼠夭折、離乳趕不上進度 —— 這些坑太鬧心!其實繁育里藏著不少關鍵技巧,今天從發(fā)情判斷、配繁操作到離乳管理,手把手教你搞定,讓實驗少走彎路~
先摸透小鼠的戀愛戒律!2招精準判斷周期
雌鼠的性周期通常為4~5天,一般分為發(fā)情前期、發(fā)情期、發(fā)情后期和發(fā)情間期四個階段。如何判斷小鼠發(fā)情周期各階段呢?
1. 看外觀 + 觀行為:快速初篩超方便
處于發(fā)情前期和發(fā)情期的雌鼠外陰紅腫濕潤、陰道口張開,并表現(xiàn)出圍繞雄鼠轉圈、輕蹭等行為。處于發(fā)情后期和發(fā)情間期的雌鼠外陰腫脹消退、陰道開口較小,行為恢復平靜。

小鼠發(fā)情周期各階段[1]
注:發(fā)情周期階段包括發(fā)情前期(A)、發(fā)情期(B)、發(fā)情后期(C)和發(fā)情間期(D)。
2. 陰道細胞涂片:精確判斷靠它
通過采集雌鼠陰道分泌物染色觀察陰道脫落細胞,根據(jù)細胞類型及其相應數(shù)量差異精準判斷周期階段。
發(fā)情前期:以有核上皮細胞為主,同時存在少量角質化上皮細胞;
發(fā)情期:主要為角質化上皮細胞;
發(fā)情后期:白細胞、角質化上皮細胞、有核上皮細胞同時存在;
發(fā)情間期:存在大量白細胞、大小不一的有核上皮細胞。

小鼠發(fā)情周期各階段陰道細胞[1]
注:白細胞(圓圈標注)、角質化上皮細胞(黑色箭頭標注)和有核上皮細胞(白色箭頭標注)。
科學的“牽線搭橋”:繁育與合籠技巧
合籠可不是隨便把兩只小鼠丟進去就行,方式選不對、細節(jié)沒做好,要么配不上,要么還打架~
1. 單對 vs 多雌配繁:按需選才不浪費

常見配繁方式
2. 選小鼠別瞎選!這3點必須盯緊
年齡需達標:選擇性成熟的健康個體,小鼠通常在36~42日齡達到性成熟(部分品系如DBA/2J和C3H性成熟較早,雌鼠約23日齡)。小鼠最佳生產(chǎn)繁育期通常為7~8個月,受品系特性和突變表型的影響,品系的實際繁育期會波動。
基因型需匹配:需匹配基因型選擇雌雄鼠,注意某些純合基因型可能導致不育或生育力低下等問題。
健康先排查:合籠前排除異常表型,如弱小、白內障、斷尾、雌鼠陰道隔膜或陰道閉鎖、雄鼠隱睪或睪丸發(fā)育不良等。
3. 合籠操作:這三個細節(jié)別做錯
放鼠順序別搞反:飼養(yǎng)環(huán)境需符合國家標準。雄鼠具有較強的領地意識,在合籠時應將雌鼠引入雄鼠的籠盒內以減少攻擊性。
時間選對省力氣:鑒于雌鼠僅在發(fā)情期排卵且交配多發(fā)生于夜間,如需獲得特定階段胚胎或誘導假孕,建議下午合籠,次晨檢查陰道栓以確認交配。
打架了趕緊分:合籠后,嗅探、追逐是正常社交行為,無需干預。若出現(xiàn)激烈打斗、撕咬導致外傷,或一方(通常是雌鼠)長時間蜷縮角落、顫抖,應立即分離并更換配對,避免嚴重應激或傷害。
確認喜訊:從陰道栓到離乳的關鍵節(jié)點
1. 陰道栓:看到了也別高興太早
陰道栓是雄鼠交配后由雄鼠精囊腺和凝固腺的分泌物在雌鼠陰道內凝固形成的白色或淡黃色凝固物,通常在交配后10~12小時可以觀察到白色、綠豆大小的陰道栓。需要注意的是,陰道栓僅表明交配行為發(fā)生,并不代表100%受孕[2]。

陰道栓觀察(見栓鼠)
2. 妊娠21天:這4個節(jié)點要記牢
雌鼠妊娠期通常為19~21天,在妊娠后期需保持環(huán)境安靜,避免不必要的抓取、換籠和噪聲干擾,防止母鼠應激、流產(chǎn)或食仔等。

3. 離乳管理:想提升幼鼠存活率,這3點別忽略
一般來說,小鼠離乳日齡為19~21天。帶仔8只母鼠的仔鼠離乳體重及成活率均顯著高于帶仔10只母鼠[4],建議適當減少母鼠帶仔數(shù)。當遇母鼠死亡、泌乳不足、棄仔或窩產(chǎn)仔數(shù)過多時,代乳是挽救幼鼠的首選方案。代乳母鼠應選擇同日或前后3天內分娩、母性強、泌乳充足的健康個體,優(yōu)先選擇與被代乳幼鼠品系毛色不同者,以方便區(qū)分。
結語
從精準牽線到科學帶娃,每一個細節(jié)都關乎科研數(shù)據(jù)的成敗。把這些技巧吃透,不僅小鼠養(yǎng)得壯,后續(xù)實驗數(shù)據(jù)也能少踩坑,說不定下一個關鍵發(fā)現(xiàn),就靠這群小家伙撐著呢!
參考文獻
[1] Byers SL, Wiles MV, Dunn SL, Taft RA. Mouse estrous cycle identification tool and images. PLoS One. 2012;7(4):e35538. doi: 10.1371/journal.pone.0035538. Epub 2012 Apr 13. PMID: 22514749; PMCID: PMC3325956.
[2] Behringer R, Gertsenstein M, Nagy KV, Nagy A. Selecting Female Mice in Estrus and Checking Plugs. Cold Spring Harb Protoc. 2016 Aug 1;2016(8). doi: 10.1101/pdb.prot092387. PMID: 27480722.
[3] Heyne GW, Plisch EH, Melberg CG, Sandgren EP, Peter JA, Lipinski RJ. A Simple and Reliable Method for Early Pregnancy Detection in Inbred Mice. J Am Assoc Lab Anim Sci. 2015 Jul;54(4):368-71. PMID: 26224435; PMCID: PMC4521569.
[4] 張靜旭,劉淑霞,馬丹,劉秀俠,薄文學.NIH小鼠生長繁殖性能的觀察[J].中國比較醫(yī)學雜志,2002,(5):292~293.
