STEAP1 (Six-Transmembrane Epithelial Antigen of the Prostate 1 ) ，是STEAP家族成員之一，是一種定位于細(xì)胞膜表面的跨膜蛋白。其獨(dú)特的拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)包含6個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域和可被抗體識(shí)別的胞外表位，在維持鐵/銅離子穩(wěn)態(tài)及細(xì)胞代謝過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。該蛋白最初在前列腺癌中被發(fā)現(xiàn)。研究證實(shí)，STEAP1在轉(zhuǎn)移性去勢(shì)抵抗性前列腺癌（mCRPC）、膀胱癌和非小細(xì)胞肺癌等多種侵襲性惡性腫瘤中呈選擇性高表達(dá)，而在正常組織中表達(dá)顯著受限。這種腫瘤特異性表達(dá)模式及其不良預(yù)后具有強(qiáng)相關(guān)性，這也確立了STEAP1作為精準(zhǔn)免疫治療理想靶標(biāo)的潛力。

近年來(lái)，針對(duì)STEAP1的新型療法呈現(xiàn)多元化發(fā)展趨勢(shì)，主要涵蓋抗體療法、CAR-T細(xì)胞療法及mRNA疫苗等領(lǐng)域。其中，由安進(jìn)與百濟(jì)神州聯(lián)合開發(fā)的雙特異性T細(xì)胞銜接器（TCE）AMG-509（Xaluritamig）占據(jù)著重要地位，作為全球首個(gè)進(jìn)入臨床試驗(yàn)的STEAP1靶向TCE藥物，AMG-509采用創(chuàng)新的"2+1"靶向設(shè)計(jì)——即同時(shí)結(jié)合兩個(gè)STEAP1表位與一個(gè)CD3分子，展現(xiàn)高親和力及腫瘤選擇性優(yōu)勢(shì)。該藥物在mCRPC患者治療中已顯示出良好的初步療效及安全性，并于2024年11月進(jìn)入III期臨床試驗(yàn)階段，有望成為STEAP1靶向治療領(lǐng)域的里程碑。目前，集萃藥康已建立系統(tǒng)化的TCE藥物評(píng)價(jià)平臺(tái)，以STEAP1靶點(diǎn)為例，相關(guān)體內(nèi)外驗(yàn)證數(shù)據(jù)梳理如下。

靶點(diǎn)表達(dá)驗(yàn)證

通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)分析不同前列腺癌細(xì)胞系中STEAP1表達(dá)譜（圖1），選用AMG-509及其二抗作為檢測(cè)抗體，篩選出高表達(dá)靶點(diǎn)的細(xì)胞系模型。

圖1. 不同前列腺癌細(xì)胞系的STEAP1表達(dá)

體外殺傷評(píng)價(jià)

報(bào)告基因法

選取LNCaP Clone FGC-luc和LNCaP C4-2B-luc兩種STEAP1高表達(dá)的熒光素酶標(biāo)記細(xì)胞株，與不同比例的外周血單核細(xì)胞（PBMC）（效靶比10:1、5:1、2.5:1）共培養(yǎng)。使用梯度濃度AMG-509處理后，檢測(cè)T細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性（TDCC）。以未處理組為基準(zhǔn)，利用相對(duì)發(fā)光單位（RLU）計(jì)算細(xì)胞毒性百分比。圖2展示了本次實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。

圖2. AMG-509體外殺傷驗(yàn)證

上述結(jié)果顯示，在一定范圍內(nèi)，TCE藥物對(duì)靶細(xì)胞殺傷活性與效靶比和共孵育時(shí)間呈正相關(guān)。報(bào)告基因法可以有效評(píng)估TCE藥物對(duì)靶細(xì)胞的殺傷效應(yīng)，并具備高通量、寬動(dòng)態(tài)范圍等優(yōu)勢(shì)，更適用于早期篩選。在具體實(shí)驗(yàn)中，可以同步結(jié)合TCE藥物的臨床分子特性，選取相對(duì)應(yīng)的條件體系進(jìn)行體外藥效評(píng)價(jià)。

抗體結(jié)合實(shí)驗(yàn)

抗體結(jié)合實(shí)驗(yàn)使用LNCaP Clone FGC和LNCaP C4-2B細(xì)胞系，與梯度濃度AMG-509共孵育后進(jìn)行流式檢測(cè)。以評(píng)價(jià)藥物在STEAP1靶點(diǎn)端的結(jié)合情況。采用T淋巴細(xì)胞腫瘤細(xì)胞JurKat評(píng)價(jià)其在CD3端的結(jié)合情況。圖3結(jié)果顯示，AMG-509可劑量依賴性結(jié)合LNCaP Clone FGC及LNCaP C4-2B細(xì)胞表面STEAP1表位；同時(shí)，并且Jurkat細(xì)胞實(shí)驗(yàn)證實(shí)其對(duì)CD3表位的有效結(jié)合。

圖3. AMG-509體外結(jié)合驗(yàn)證

體內(nèi)藥效驗(yàn)證

我們?cè)贜CG重度免疫缺陷小鼠模型中，移植STEAP1高表達(dá)腫瘤細(xì)胞（LNCap Clone FGC/LNCaP C4-2B）并重建人源PBMC免疫系統(tǒng)，進(jìn)一步開展初步藥效學(xué)評(píng)價(jià)。圖4和圖5為體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，AMG-509在兩個(gè)細(xì)胞系模型（各使用兩名供體PBMC）中均表現(xiàn)出顯著抑瘤效果，驗(yàn)證了其體內(nèi)抗腫瘤活性。

圖4. AMG-509在LNCaP Clone FGC移植huPBMC-NCG模型中的體內(nèi)藥效學(xué)評(píng)價(jià)

圖5. AMG-509在LNCaP C4-2B移植huPBMC-NCG模型中的體內(nèi)藥效學(xué)評(píng)價(jià)

上述體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)驗(yàn)證了AMG-509作為靶向毒素治療藥物的潛力。

集萃藥康基于成熟的分子與細(xì)胞實(shí)驗(yàn)和分析平臺(tái)、高靈敏度流式檢測(cè)技術(shù)及多樣化腫瘤動(dòng)物模型資源，構(gòu)建了涵蓋抗體偶聯(lián)藥物（ADC）、T細(xì)胞銜接器（TCE）、單克隆抗體及小分子抑制劑等各類藥物的研發(fā)支持體系。該平臺(tái)可為藥物研發(fā)提供包括靶點(diǎn)驗(yàn)證、藥效學(xué)評(píng)價(jià)和非GLP安全性評(píng)價(jià)等臨床前研究，有助于深入解析藥物作用機(jī)制、加速創(chuàng)新療法開發(fā)，并為探索新型聯(lián)合治療策略提供核心驅(qū)動(dòng)力，持續(xù)為腫瘤治療領(lǐng)域注入新的可能。